培养基是微生物试验的基础,直接影响微生物试验结果,可通过培养基质控试验评定培养基的质量是否满足相关法规要求。
目的
外观检查:主要观察培养基的颜色、透明度、均匀度以及有无沉淀、杂质等。例如,营养琼脂培养基通常为淡黄色、透明或半透明的凝胶状,若出现颜色异常、有明显沉淀或杂质,则可能影响培养基的质量。
pH 值测定:每种培养基都有其特定的 pH 范围要求,以满足不同微生物的生长需求。例如,大多数细菌适宜在中性至微碱性的培养基中生长,而真菌则更适合在偏酸性的培养基中生长。通过使用 pH 计等仪器测定培养基的 pH 值,确保其在规定的范围内。
无菌性检查:这是培养基质控试验中非常重要的一项。将配制好的培养基在培养箱中培养一定时间(通常为 24 - 48 小时),观察是否有微生物生长。若有菌落出现,说明培养基受到了污染,不能用于微生物检测。
性能验证:
生长试验:使用已知的标准菌株接种到待检测的培养基上,在适宜的条件下培养,观察菌株的生长情况。如在血平板上接种金黄色葡萄球菌,若培养基性能良好,金黄色葡萄球菌应能在平板上形成典型的菌落,且生长良好。
选择性试验:对于选择性培养基,需验证其是否能抑制非目标微生物的生长,同时促进目标微生物的生长。例如,麦康凯培养基是用于分离肠道杆菌的选择性培养基,它能抑制革兰氏阳性菌的生长,而使大肠埃希菌等革兰氏阴性菌在其上生长并形成特征性菌落。
鉴别试验:鉴别培养基应能根据微生物的代谢特点,将不同种类的微生物区分开来。例如,伊红美蓝培养基可用于鉴别大肠埃希菌和产气肠杆菌,大肠埃希菌在该培养基上生长会形成具有金属光泽的紫黑色菌落,而产气肠杆菌形成的菌落则为淡红色。