iPSC基因编辑
iPSC基因编辑
iPSC（诱导多能干细胞）基因编辑，是指通过基因工程技术（如 CRISPR-Cas9、ZFN 等）对 iPSC 的基因组进行精准修饰（敲除、插入、突变等），再利用 iPSC 的多向分化能力，获得携带特定基因修饰的功能细胞（如神经元、心肌细胞），核心用于疾病模型构建、细胞治疗研发等场景。
泰斯拓技术优势
多种骨架载体选择
高效的单克隆分选技术
多种转染或感染方式
严格的质控体系
iPSC基因编辑服务类型
基因敲除
通过 CRISPR-Cas9 等工具切断靶基因序列，利用细胞非同源末端连接（NHEJ）造成移码突变，使基因功能丧失。用于构建疾病模型（如敲除致病基因验证功能）。
基因敲入
将外源正常基因或标记基因（如 GFP），通过同源重组（HDR）精准插入基因组特定位点。可用于修复患者 iPSC 的致病突变，或标记特定细胞用于示踪。
基因点突变
对基因组特定碱基进行精准替换（如单碱基编辑技术），不引入大片段插入或缺失。适用于纠正单碱基突变导致的遗传病（如镰刀型贫血）。
多基因编辑
同时对多个基因进行敲除、敲入或突变，可用于构建复杂疾病模型，或优化 iPSC 分化方向（如同时调控多个分化相关基因）。
细胞株构建服务流程
FAQs
1.什么是基因干扰？
基因干扰（Gene Interference） 是一类通过特定分子（如 RNA、蛋白质复合物）调控基因表达的机制，核心是在转录或转录后水平抑制目标基因的表达（使基因 “沉默”），不改变基因组 DNA 序列，仅阻断基因向蛋白质的转化过程，最终导致目标蛋白产量下降或功能丧失。
2.稳定转染与瞬时转染的区别？
| 对比维度 | 稳定转染 | 瞬间转染 |
|---|---|---|
| 基因整合状态 | 外源基因整合到细胞基因组 | 外源基因游离于细胞质，不整合进基因组 |
| 表达时效 | 长期稳定表达(传代后不丢失) | 短期表达(通常持续2-7天，随细胞分裂逐渐降解) |
| 筛选过程 | 需加抗生素等筛选压力，筛选阳性克隆 | 无需筛选，转染后直接检测表达 |
| 操作周期 | 长（数周，含筛选、单克隆化） | 短（1-3 天即可获得表达产物） |
| 适用场景 | 稳转细胞株构建、长期功能研究、蛋白量产 | 短期基因功能验证、小量蛋白制备、高通量筛选 |
| 细胞要求 | 需分裂活跃的细胞，便于基因整合 | 对细胞增殖能力要求低，适用于多数细胞 |
3.siRNA、shRNA和CRISPR干扰（CRISPRi）有什么区别？
| 技术类型 | 作用原理 | 沉默时效 | 编辑类型 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|
| siRNA | 化学合成的短双链 RNA，直接与 RISC 复合物结合，降解靶 mRNA | 瞬时（3-7 天） | 转录后水平沉默（不改变基因组） | 快速验证基因功能、短期干扰实验 |
| shRNA | 构建含短发夹 RNA 的表达载体，转染后转录为 shRNA，经加工为 siRNA 发挥作用 | 稳定（可整合至基因组，长期沉默） | 转录后水平沉默（不改变基因组） | 构建干扰稳转细胞株、长期功能研究 |
| CRISPRi | 用失活的 Cas9（dCas9）结合 sgRNA 靶向基因启动子，阻断 RNA 聚合酶结合 | 稳定（dCas9/sgRNA 可整合至基因组） | 转录水平沉默（不改变基因组） | 精准沉默特定基因、多基因同时干扰、长链非编码 RNA 研究 |
