介绍
葡萄膜黑色素瘤（uveal melanoma, UM）是成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，起源于眼睛葡萄膜（包括虹膜、睫状体和脉络膜）中的黑色素细胞。它可能表现为视力下降、视野缺损、眼前黑影或光斑，早期可能无症状，晚期可能转移至肝、肺等器官，威胁生命。
92-1细胞则是一种来源此人类葡萄膜黑色素瘤的上皮样肿瘤细胞系，最初建立自一位76岁女性患者右眼眶的原发性葡萄膜黑色素瘤组织。92-1细胞系是在欧洲委员会第五框架计划（合同编号QLRI-CT-2001-01325）资助的ESTDAB项目（European Searchable Tumour Cell Line Database）中收集的170余种特征性黑色素瘤细胞系之一。
别称：92_1; 92.1; 921
种属：人
组织来源：人眼葡萄膜黑色素瘤
形态与生长：呈上皮样、贴壁生长
主要应用领域
92-1细胞在科学研究中用途广泛，主要集中在以下几个方面:
1、 肿瘤生物学研究
研究葡萄膜黑色素瘤的增殖、凋亡、侵袭和转移的分子机制；
探索信号通路（如MAPK、PI3K/AKT、Hippo等）在肿瘤发生发展中的作用。
2、 转移机制研究
葡萄膜黑色素瘤最主要的转移部位是肝脏。92-1细胞常被用来建立体外侵袭模型和体内肝转移模型（例如，通过脾脏注射将细胞植入小鼠体内，模拟肝转移过程），以研究其嗜肝转移的机制。
3、药物筛选
作为模型，用于测试新型化疗药物、靶向治疗药物、免疫治疗药物（尽管UM对传统免疫检查点抑制剂反应不佳）以及表观遗传药物的有效性。
4、 基因功能研究
通过在该细胞中进行基因过表达、敲低或敲除，可以研究特定基因在肿瘤进展中的功能。
培养基与培养条件
培养基选择：
RPMI-1640+10%胎牛血清（FBS）+1%双抗（青霉素/链霉素）。
培养环境：
37℃、5% CO₂、湿度70%-80%的培养箱。
细胞复苏与传代
复苏：
将含有1ml 92-1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4-5ml完全培养基混合均匀，1000rpm离心3-5分钟，弃上清，用1ml 10 % FBS的完全培养基（RPMI-1640 + 10 % FBS + 1 % P/S）完全培养基重悬细胞加入至T25瓶中，同时向T25瓶加入约5-6ml完全培养基充分混匀(标记日期、所用培养基名称和细胞名称），37℃培养。
传代（显微镜下观察细胞状态与密度，当细胞状态良好且汇合度达80%-90%时可进行传代）
弃去培养上清，用2 mL PBS轻柔润洗瓶壁1-2次，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA（T25瓶1-2ml），37℃消化1-2分钟，镜下观察细胞变圆脱落时，加3 mL含10 % FBS的完全培养基（RPMI-1640 + 10 % FBS + 1 % P/S）完全培养基终止消化，轻柔吹打细胞，1000rpm离心3-5分钟，弃上清，按1:2-1:3比例分到新培养瓶，补加完全培养基，铺匀细胞，37 °C培养。
细胞冻存
在显微镜下观察细胞密度与状态，当细胞生长状态良好、细胞汇合度达80–90%时，进行细胞冻存操作。
收集细胞及培养液，1000rpm离心3-5分钟，弃上清，用冻存液重悬细胞，细胞计数并调整密度至3×10⁶-5×10⁶个/ml，将细胞悬液分装入冻存管，每管1-1.5ml，在冻存管上标记细胞名称、代数、冻存时间及操作者信息，放入程序降温盒，-80℃过夜后转移至液氮保存。
冻存液配制：90%血清+10% DMSO，现用现配。
注意事项
1）在实验前要对操作台进行紫外照射、75%酒精擦拭操作台面，确保无菌；
2）解冻时，注意不可超过冻存管的管口，防止造成污染；
3）细胞传代时，不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程；
4）用胰蛋白酶消化后轻轻吹打分散细胞，避免过度吹打损伤细胞；
5）DMSO有一定毒性，冻存液配制后应尽快使用；
6）冻存管需拧紧，防止液氮泄漏或复苏时爆裂。
